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技术简介：2006年我国南方爆发的“高热病”由Nsp2基因部分缺失的猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）突变株引起，目前，该病几乎已扩散到全球所有养猪业发达的国家和地区，给世界养猪业每年造成的损失达几十亿美元，成为近年来世界兽医学界异常关注的疾病之一，因此PRRSV感染的早期检测刻不容缓。一步反转录环介导等温扩增技术（Reverse transcription-1oop mediated isothermal amplification，RT-LAMP）具有特异、快速、灵敏、简便的特点，可用于PRRSV早期快速检测，并因简单易行，适于基层和现场检测。
环介导等温扩增(，LAMP)技术是近年来发展出的一种敏感、特异、方便快捷的核酸扩增技术。与传统PCR方法相比，LAMP不需要热循环，为等温扩增。且由于LAMP反应中产生大量的副产物一白色焦磷酸铗沉淀，也可用结合双链DNA的荧光染料SYBR Green I染色，扩增产物可不经过电泳，通过肉眼观察或浊度计或紫外灯即可判定结果。因此LAMP是一种不需要热循环仪、肉眼即可判定结果的高度特异和敏感的DNA扩增方法。该方法具有特异性强、等温灵敏、操作简单、产物易检测等优点，适合于现场、战时野外或条件较差的实验室进行病原微生物的快速检测。
该方法采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)，在恒温条件(60-65℃)，进行核酸的指数级扩增，在45-60 min的时间里其扩增效率可达到109-1010个数量级，结果可以直接肉眼观察，不需要特殊仪器设备，适合于现场、战时野外或条件较差的实验室进行病原微生物的快速检测。
技术来源：国家科技计划
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